石蜡切片机和冰冻切片怎么区分呢？

石蜡切片和冰冻切片是组织学中最常用的两种切片方式。顾名思义，本质上的不同就是将组织固化的方式不同：一种是用石蜡固化；另一种是用冰冻的方法（这个和羊肉卷的制作方式有些类似）。两者各有优缺点，在实验的应用上，石蜡切片常应用于IHC（免疫组化）实验，冰冻切片常应用于IF（免疫荧光）实验。他们相同的是应用的免疫学基本原理，即抗原与抗体特异性结合的原理。

石蜡切片机

下面详细介绍两种方法的异同点：

一、石蜡切片

石蜡切片技术是常规制片里面应用最广泛的方法。一般组织从取材固定再到制片成标本需要数天的时间，但是标本是可以长期保存的，属于一种永久性显微玻片技术。

固定：将新鲜组织切成小块，固定于4%多聚甲醛过夜。

脱水：为了减少组织材料的急剧收缩，应使用从低浓度到高浓度递增的顺序进行经70%、85%、95%直至纯酒精（无水乙醇），每次时间为1小时。

透明:常用的透明剂有二甲苯，二甲苯是石蜡的溶剂。此步最好在通风厨进行。

浸蜡:先把组织材料块放在熔化的石蜡和二甲苯的等量混合液浸渍1小时。

先后移入2个熔化的石蜡液中浸渍1小时左右。

包埋：以少许热蜡液将其底部迅速贴附于包埋盒内上，然后置于速冻台，让石蜡固定。

切片：切片刀的锐利与否、蜡块硬度是否适当都直接影响切片质量，可将蜡块至于冷水中改变蜡块硬度。通常切片厚度为5微米，用毛笔轻托轻放在37度水浴中展片。

贴片与烤片：

将水浴中展片捞至玻片上铺正，然后将载玻片放入37℃温箱中干燥。

二.冰冻切片

相比于石蜡切片-冰冻切片优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性，做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构，可能会使抗原弥散。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便，而多应用于手术中的快速病理诊断。

冷冻切片机

冰冻切片相比较于石蜡切片简单易行，一般进行固定脱水后，固定于包埋剂就可以在冰冻切片机进行切片。有些新鲜标本可以直接取材后，冷冻托涂包埋剂后置于冷冻托上速冻，冻好后立即切片。

冰冻切片最重要的是防止样品中冰晶的出现，一般可以通过速冻的方法使组织温度骤降，减少样品内冰晶的形成。也可以将组织置于20％～30％蔗糖溶液1～3天，利用高渗吸收组织中水分，减少组织含水量。

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